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CHO细胞高密度瞬时转染

杂交瘤系列造就基

颁布功夫::2020-11-27 浏览次数::1726



CHO细胞高密度瞬时转染



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  Hi-KDCHO-K(K03205K)为普洱zoty·中欧自主开发的重组蛋白CHO细胞超高密度瞬转表白系统,与普洱zoty·中欧从CHO-K1细胞中所筛选驯化的CHOK1-Hi细胞共同使用可较大幅度提高重组蛋白的CHO细胞表白量。。。

  该系统蕴含CHO细胞超高密度造就液 、转染试剂 、蛋白表白加强剂以及植物蛋白胨营养增长剂。。。

01


瞬时转染

    1.将处于对数成持久的CHOK1-Hi细胞离心重悬至20×10^6个/ml的密度,震

  荡造就1小时后从造就箱中取出进行转染;

    2.转染时直接增长质粒至细胞造就中(按终浓度17ug/ml推算),充分摇匀

  后,再增长转染试剂(TA-CHO)(增长量按终浓度35ug/ml推算),充分混匀

  后将其放回造就箱中进行造就;

    3.在造就箱中造就5小时后,以体积为2::1的比例(2份Hi- KDCHO,1份转染

  细胞悬液)用Hi-KDCHO造就液将转染后的细胞稀释后,放回造就箱中造就。。。





02


产品表白与检测 

  

   1.转染24小时后参与细胞蛋白表白加强剂KE-CHO和营养补充剂KT-Feed,以

  增长产品表白量;

   2.待转染后的细胞成长至10×10^6个/ml时(通常为接种后的1~2天),需每

  天增长1g/L的葡萄糖,若细胞成长至20×10^6个/ml时(通常为接种后的4~6

  天),葡萄糖的增长量可加倍;

   3.转染后第5-7天测定产品表白量,客户可凭据细胞状态及表白量选择合适的收

  获功夫。。。

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