1. 经过ELISA检测与细胞单克。。，所筛选的杂交瘤细胞扩增至含5%FBS血清KTM2或其它造就液的T75方瓶中静置造就，，，每天观察细胞活率及密度；；；

  2. 细胞经过一周三次换液的静置造就，，，细胞聚合度达到80%以上时，，，将方瓶内的造就液置换成含5%FBS的KD-Hybri造就液造就一代，，，主张是让细胞提前适应在KD-Hybri造就液里扩增；；；

  3. 随后将方瓶中约90%细胞转移至250ml摇瓶进行逐级降血清悬浮造就（造就体积为摇瓶容积的1/5）。。补充含5%FBS新鲜的KTM2造就液于方瓶中持续造就渣滓约10%细胞，，，用于细胞保种；；；

  4. 摇瓶逐级降血清的过程通常为5%FBS→2.5%FBS→无血清。。从5%FBS降至2.5%FBS血清时，，，吸走25mL造就液及细胞，，，补充25mL不含血清的新鲜KD-Hybri造就液，，，使血清浓度降为原来的一半；；；

  5. 实现2.5%FBS造就后，，，将细胞全数转移至50ml离心管，，，1000rpm离心5min，，，再用新鲜KD-Hybri造就液重悬细胞，，，将细胞稀释至1.0×10^6个/ml，，，接种至250ml摇瓶中进行无血清造就；；；

  6. 实现驯化无血清造就后，，，选择对数成持久（1.5-3.5×10^6个/ml）的细胞进行传代，，，以密度为0.5×10^6个/ml接种，，，每隔三天传代一次。。